< Tests
Ποιοι είναι οι διαφορετικοί τύποι ορολογικών εξετάσεων;
Κείμενο ενημερώθηκε 2020-04-30
Υπάρχουν διάφοροι τύποι ορολογικών εξετάσεων για την ανίχνευση της παρουσίας στο αίμα συγκεκριμένων αντισωμάτων κατά του ιού SARS-CoV-2 ή της αποτελεσματικότητάς τους κατά της επανμόλυνσης.
Υπάρχουν τρεις τύποι τέστ που χρησιμοποιούν τον ορό του αίματος (ορολογικές εξετάσεις) και διαφέρουν από την άποψη της δυσκολίας, της ευαισθησίας και του κόστους:
Γρήγορος διαγνωστικός έλεγχος (TDR): διάρκεια 10-30 λεπτά
Αυτό είναι συνήθως μια ποιοτική δοκιμή (θετική ή αρνητική) με πλευρική ροή, μικρό μέγεθος και φορητή. Οι δοκιμές αυτές μπορούν να χρησιμοποιούν δείγματα αίματος που έχει ληφθεί μετά από τσίμπημα σε δάχτυλο, δείγμα σάλιου ή ρινικό επίχρισμα. Τα TDRs είναι συχνά παρόμοια με τα τεστ εγκυμοσύνης, καθώς το τεστ στον χρήστη το χρωματιστές γραμμές για να δείξει θετικά ή αρνητικά αποτελέσματα. Σύμφωνα με τη νόσο COVID-19, αυτές οι δοκιμές πιο συχνά αναζητούν τα αντισώματα του ασθενούς (IgG και IgM), ή το ιικό αντιγόνο. Αυτές οι δοκιμές δεν μπορούν να ποσοτικοποιήσουν την ποσότητα των αντισωμάτων που υπάρχουν στον ορό του ασθενούς, ούτε μπορούν να καθορίσουν εάν αυτά τα αντισώματα είναι ικανά να αποτρέψουν τη μόλυνση στο μέλλον.
Ανοσο-ενζυμική δοκιμή (ELISA): διάρκεια 1 - 5 ώρες
Αυτή η δοκιμή μπορεί να είναι ποιοτική ή ποσοτική και γίνεται συνήθως στο εργαστήριο. Αυτές οι εξετάσεις χρησιμοποιούν συνήθως δείγματα του συνολικού αίματος, ή κλάσματα αίματος των ασθενών. Η δοκιμή βασίζεται στη χρήση ενός πιάτου που καλύπτεται με μια ιογενή πρωτεΐνη ενδιαφέροντος, όπως η πρωτεΐνη "Spike" του ιικού φακέλου. Τα δείγματα των ασθενών στη συνέχεια επωάζονται με την πρωτεΐνη, και εάν ο ασθενής έχει αντισώματα κατά της ιογενούς πρωτεΐνης, συνδέονται μεταξύ τους. Το σχετικό σύμπλεγμα αντισωμάτων-πρωτεϊνών μπορεί στη συνέχεια να ανιχνευθεί από ένα άλλο «αντίσωμα» που παράγει ένα έγχρωμο ή φθορισμού σήμα. Στο COVID-19, αυτές οι δοκιμές χρησιμοποιούνται συχνότερα για την ανίχνευση της παρουσίας αντισωμάτων που παράγονται από τον ασθενή (IgG και IgM). Ωστόσο, αυτές οι δοκιμές δεν μπορούν να καθορίσουν εάν αυτά τα αντισώματα εξουδετερώνονται, δηλαδή ικανά να προστατεύσουν από μελλοντική μόλυνση με τον ίδιο ιό.
Δοκιμή εξουδετέρωσης: 3-5 ημέρες
Αυτή η δοκιμή ανιχνεύει την παρουσία αντισωμάτων που μπορούν να αποτρέψουν μια ιογενή λοίμωξη στα κύτταρα στο εργαστήριο. Οι δοκιμές εξουδετέρωσης μπορούν να πουν στους ερευνητές εάν ένας ασθενής έχει τα ενεργά και αποτελεσματικά αντισώματα στον ιό, ακόμα κι αν είναι ασυμπτωματικά ή θεραπευμένα. Αυτές οι εξετάσεις απαιτούν δείγματα αίματος από τον ασθενή. Οι δοκιμές εξουδετέρωσης βασίζονται στην κυτταρική καλλιέργεια, μια εργαστηριακή μέθοδος για την αντιμετώπιση της εξάπλωσης του ιού SARS-CoV-2 στα κύτταρα. Όταν ο ιός και τα κύτταρα καλλιεργούνται με τη μείωση των συγκεντρώσεων των αντισωμάτων του ασθενούς, οι ερευνητές μπορούν να απεικονίσουν και να καθορίσουν τη δόση των αντισωμάτων στο αίμα του ασθενούς που μπορεί να εμποδίσει τον ιό από τον πολλαπλασιασμό. Αυτές οι δοκιμές μπορούν να καθορίσουν εάν τα αντισώματα είναι ικανά να προστατεύσουν από τη μελλοντική μόλυνση αλλά δεν ανιχνεύουν την παρουσία αντισωμάτων ενάντια στις ιογενείς πρωτεΐνες που δεν εμπλέκονται στη διαδικασία μόλυνσης.
Πηγές
Περίληψη του Πανεπιστημίου Johns Hopkins σχετικά με τις ορολογικές δοκιμές που αναπτύχθηκαν κυρίως από τις Ηνωμένες Πολιτείες, την Κίνα, τη Νότια Κορέα, τη Σιγκαπούρη, τη Γερμανία και την Αγγλία.
Κινητική απόκρισης αντισωμάτων: Χρησιμοποιώντας μια δοκιμή ELISA βασισμένη στην ανασυνδυασμένη ιογενή νουκλεοcapside, μια μελέτη εξέτασε τη χιουμοριστική απάντηση του ξενιστή στις απαντήσεις SARS-CoV-2, συμπεριλαμβανομένων των αποκρίσεων IgA, IgM και IgG. Συνολικά συλλέχθηκαν 208 δείγματα πλάσματος από 82 επιβεβαιωμένα κρούσματα και 58 πιθανά κρούσματα. Η διαγνωστική αξία του IgM αξιολογήθηκε σε αυτή την κοόρτη. Η διάμεση διάρκεια ανίχνευσης αντισωμάτων IgM και IgA ήταν 5 ημέρες, ενώ το IgG ανιχνεύθηκε 14 ημέρες μετά την έναρξη των συμπτωμάτων, με θετικό ποσοστό 85,4%, 92,7% και 77,9% αντίστοιχα.
Wu, F., Wang, A., Liu, M., Wang, Q., Chen, J., Xia, S., ... & Jiang, S. (2020). Neutralizing antibody responses to SARS-CoV-2 in a COVID-19 recovered patient cohort and their implications.Μία μελέτη μέτρησε την κινητική των αποκρίσεων IgM και IgG σε 34 ασθενείς:
Ξιάο, Γκάο και Ζανγκ. J Inf 2020. Προφίλ συγκεκριμένων αντισωμάτων στο SARS-CoV-2: Η πρώτη έκθεση.Ανοσολογικές δοκιμές πραγματοποιήθηκαν επίσης σε 16 ασθενείς στο Χονγκ Κονγκ με τη χρήση δειγμάτων ορού που ελήφθησαν 14 ημέρες ή περισσότερο μετά την εμφάνιση των συμπτωμάτων. Τα ακόλουθα οροθετικά ποσοστά αναφέρθηκαν: 94% για την αντι-Ν IgG (n-15), 88% για την αντι-N IgM (n-14), 100% για την αντι-RBD IgG (n-16) και 94% για την αντι-RBD IgM (n-15). Τα επίπεδα anti-SARS-CoV-2-N ή Anti-SARS-CoV-2-RBD IgG συσχετίζονται με τον τίτλο εξουδετέρωσης του ιού.
To KK, Tsang OT, Leung WS, Tam AR, Wu TC, Lung DC, Yip CC, Cai JP, Chan JM, Chik TS, Lau DP, Choi CY, Chen LL, Chan WM, Chan KH, Ip JD, Ng AC, Poon RW, Luo CT, Cheng VC, Chan JF, Hung IF, Chen Z, Chen H, Yuen KY. Temporal profiles of viral load in posterior oropharyngeal saliva samples and serum antibody responses during infection by SARS-CoV-2: an observational cohort study. Lancet Infect Dis. 2020 Mar 23. pii: S1473-3099(20)30196-1.Une étude a caractérisé les réponses des anticorps sur une cohorte de 175 patients COVID-19 présentant des symptômes légers. Les personnes âgées et les patients d'âge moyen avaient des titres plasmatiques de NAb et des anticorps fixant significativement plus élevés (P<0,0001 et P=0,0003 respectivement e que ceux des jeunes patients.
Wu, F., Wang, A., Liu, M., Wang, Q., Chen, J., Xia, S., ... & Jiang, S. Neutralizing antibody responses to SARS-CoV-2 in a COVID-19 recovered patient cohort and their implications.Catalan-Dibene σχολίασε μια μελέτη που δείχνει την ύπαρξη του ιού ειδικά κύτταρα μνήμης αναγνωρίζοντας την πρωτεΐνη SARS-CoV-2 σε μολυσμένους ασθενείς.
Catalan-Dibene J. Human antibodies can neutralize SARS-CoV-2. Nat Rev Immunol. 2020 Apr 14.Περιγραφή υψηλής ποιότητας ορολογικών δοκιμών Παστέρ: ορομετατροπή και εξουδετέρωση αντισωμάτων του coronavirus εμφανίστηκε 5 έως 14 ημέρες μετά την εμφάνιση των συμπτωμάτων, επιβεβαιώνοντας προηγούμενες μελέτες.
Grzelak, L., Temmam, S., Planchais, C., Demeret, C., Huon, C., Guivel, F., . . . van der Werf, S. (2020). Ορολογική ανάλυση SARS-CoV-2 των ασθενών που νοσηλεύονται COVID-19, pauci-συμπτωματικά άτομα και αιμοδότες. medRxiv, 2020.2004.2021.20068858. doi:10.1101/2020.04.21.20068858.